本品為預(yù)先制配好的快速轉(zhuǎn)印緩沖液，含散熱因子配方

 

可承受400mA電流在30分鐘即完成蛋白轉(zhuǎn)印過程

(視轉(zhuǎn)印目的蛋白分子量的大小來調(diào)整轉(zhuǎn)印時間長短)

 

常溫條件下轉(zhuǎn)印，無須在冰浴條件下進行

可兼容適用于其他品牌制成的PAGE膠或電泳后的PAGE膠

搭配QuickRun能達到更好條帶效果

適用于不同品牌轉(zhuǎn)印設(shè)備,無須替換設(shè)備

未開封常溫條件下保存五年

 

 

產(chǎn)品優(yōu)點：

本配方緩沖液可以大大加快轉(zhuǎn)印的速度，并且在轉(zhuǎn)印過程中，不會產(chǎn)生大量熱量，

不會導(dǎo)致蛋白變異或降解，不會破壞蛋白本身的完整性。

•快速:  相較傳統(tǒng)方式的90分鐘-4小時，此緩沖液可以將轉(zhuǎn)印時間縮短到< 50分鐘。

•兼容性:  可使用現(xiàn)有設(shè)備，適用所有的蛋白膠，濕轉(zhuǎn)系統(tǒng)以及膜類型。

•轉(zhuǎn)印效率高: 100% 轉(zhuǎn)移6-240kD蛋白。

•工作液可重復(fù)使用3-5次。

注意：

1.具體轉(zhuǎn)印時間需針對蛋白大小略微調(diào)整；不同廠家電源供應(yīng)器的電阻所造成電壓和電流失衡

  

  需留意，我們所建議條件是400mA電流對應(yīng)約為80-110V電壓。

2.緩沖液可以反復(fù)利用，但每次使用的轉(zhuǎn)印時間會改變緩沖液的離子濃度和PH值,因此重復(fù)使用

  

  次數(shù)可觀察緩沖液的澄清度及黏稠度;

3.反復(fù)利用的緩沖液須冷藏保存，以避免長菌;

4.不同蛋白大小所需轉(zhuǎn)印時間不同,一般50KDa大小以內(nèi)的目的蛋白約30分鐘,50KDa-120KDa的

  

 

  目的蛋白需要多加5-10分鐘, 120KDa-180KDa的目的蛋白可再加5-10分鐘

  (以上僅供參考建議,實際要考慮目的蛋白在總蛋白中的含量濃度占比) 

 

 

 

用于蛋白轉(zhuǎn)印實驗（將蛋白從膠上轉(zhuǎn)移到PVDF膜上）

 

 

在WB過程中從SDS-PAGE膠上轉(zhuǎn)移蛋白至膜上是非常關(guān)鍵的步驟

優(yōu)化轉(zhuǎn)移時間往往需要實驗多次，如何保證蛋白完全轉(zhuǎn)移技巧:

1.使用預(yù)染的marker:

 預(yù)染marker能夠直觀的觀察到跑膠情況，而且在轉(zhuǎn)移過程中也是很好的工具，

 在完成印跡后觀察膜上的 marker 看是否所有條帶都已經(jīng)轉(zhuǎn)移至膜上。

2.在轉(zhuǎn)印裝置中加兩塊膜:

 小分子量的蛋白轉(zhuǎn)移的比較快，為保證大分子蛋白的轉(zhuǎn)印，長時間的轉(zhuǎn)印可能使小分子蛋白透過膜，

 可以加入兩塊膜，如果能在第二塊膜上檢測到小分子蛋白，說明轉(zhuǎn)印時間過長。

 

3.在轉(zhuǎn)印后對膠染色:

 如果轉(zhuǎn)印時間不夠優(yōu)化，通過對膠染色，在膠上能夠觀察到未轉(zhuǎn)移完全的蛋白，

 這種情況在轉(zhuǎn)印大分子蛋白是常見，使用銀染或者考馬斯亮藍的方法都可以。