一、實驗介紹
gRNA識別並結(jié)合在目標基因區(qū)域引導Cas9蛋白隊結(jié)合位點進行切割,引起DNA雙鏈斷裂(DSB),觸發(fā)細胞自身的非同源末端修復機制(NHEJ),NHEJ修復的過程中往往會產(chǎn)生DNA的插入或刪除(Indel),造成移碼突變,致使基因功能喪失,從而實現(xiàn)基因敲除
二、實驗週期
45-60 工作日
三、交付標準
篩選獲得的單克隆細胞二份、測序結(jié)果
四、客戶提供
序列/菌株及信息;敲除基因的名稱或敲除序列
五、實驗流程
細胞鑑定 gRNA設計 CRISPR/Cas9載體構(gòu)建 gRNA靶點活性檢測
基因敲除細胞系構(gòu)建 基因型鑑定
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